Cromatografia em coluna de rotação
2. Coluna Cromatográfica (tipo de rotação)
3. Coluna Cromatográfica (manual)
*** Lista de preços para todo acima, pergunte -nos para obter
Descrição
Parâmetros técnicos
Cromatografia em coluna de spin,Conhecida como cromatografia em coluna centrífuga em chinês, é uma importante técnica de separação no campo da bioquímica e da biologia molecular. A técnica envolve a colocação de uma pequena coluna de cromatografia em um tubo de centrífuga e a utilização da força centrífuga em vez da gravidade tradicional para obter uma rápida cromatografia de pequenas quantidades de amostras. A cromatografia da coluna centrífuga é comumente usada para aplicações como a dessalinização de filtração em gel e a cromatografia de adsorção e é particularmente adequada para o manuseio de amostras de micro-volume.
Parâmetro
Na cromatografia da coluna centrífuga, a mistura de amostra é separada por força centrífuga através de uma fase estacionária e uma fase móvel na coluna de cromatografia. A fase estacionária é geralmente composta de adsorventes como sílica gel e alumina, enquanto a fase móvel é um solvente líquido. Dependendo dos coeficientes de partição dos componentes na amostra entre a fase estacionária e a fase móvel, a velocidade do movimento dos componentes dentro da coluna varia, realizando assim a separação dos componentes.
A cromatografia da coluna centrífuga é amplamente utilizada na bioquímica e na biologia molecular devido à sua facilidade de operação, velocidade de separação rápida e baixo consumo de amostra. Ao selecionar fases estacionárias e móveis apropriadas e otimizar as condições de centrifugação, a cromatografia em coluna centrífuga pode efetivamente separar e purificar compostos alvo, fornecendo amostras de alta qualidade para análises e experimentos bioquímicos subsequentes.
Bioquímica e Biologia Molecular
Extração e purificação do ácido nucleico:
Extração de DNA: extração eficiente de DNA genômico de alta qualidade de amostras biológicas, como células, tecidos e sangue.
Extração de RNA: extração do RNA total ou tipos específicos de RNA, como o mRNA.
Purificação do DNA do plasmídeo: Purifique o DNA do plasmídeo de culturas bacterianas.
Limpeza do produto de PCR: Remova impurezas como iniciadores, nucleotídeos e enzimas dos produtos de PCR.
Purificação de proteínas e peptídeos:
Utilizando cromatografia em coluna centrífuga, a separação e purificação de proteínas podem ser alcançadas de acordo com suas propriedades físico -químicas, como tamanho, carga e hidrofilicidade.
É particularmente adequado para a purificação de proteínas de rastreamento, como a extração de proteínas alvo de amostras biológicas complexas.
Remoção de pequenas moléculas e carboidratos:
Durante a preparação da amostra, geralmente é necessário remover impurezas e carboidratos de pequenas moléculas para melhorar a pureza e a qualidade da amostra. A cromatografia em coluna centrífuga pode efetivamente atingir esse objetivo.
Amostra de espectrometria de massa líquida Pré-tratamento:
Na análise de espectrometria de massa líquida, a pureza e a concentração da amostra são críticas para os resultados analíticos. A cromatografia da coluna centrífuga pode ser usada para a purificação ou pré-tratamento de pequenos volumes de amostras (por exemplo, 10 UL a 150 UL) para espectrometria de massa líquida para melhorar a pureza da amostra e a precisão dos resultados analíticos.
Outras aplicações:
A cromatografia em coluna centrífuga também pode ser usada em cenários experimentais, como remoção de radiolabel, tradução de Nick, separação de afinidade, dessalinização e substituição de buffer.
Além disso, a cromatografia da coluna centrífuga tem sido amplamente utilizada na indústria de biotecnologia para extração e purificação de ingredientes biologicamente ativos no desenvolvimento e produção de biofarmacêuticos devido à sua facilidade de operação, velocidade de separação rápida e baixo consumo de amostra.
Explicação do processo de purificação e seu significado
A cromatografia em coluna de rotação desempenha um papel vital na purificação de proteínas e peptídeos.
Processo de purificação
Preparação de amostras:
Primeiro, uma mistura contendo a proteína ou peptídeo alvo é extraída da amostra biológica.
A amostra pode precisar passar por algumas etapas de pré-tratamento, como a remoção de impurezas, como material particulado, lipídios e ácidos nucleicos para melhorar a eficiência da purificação.
Seleção e carregamento de colunas centrífugos:
Selecione uma coluna centrífuga adequada baseada nas propriedades físico -químicas da proteína ou peptídeo alvo. As fases estacionárias para colunas centrífugas podem incluir géis de diferentes tamanhos de poros, ligantes de afinidade ou outros tipos de adsorventes.
Carregue a fase estacionária na coluna de centrifugação e verifique se ela é distribuída uniformemente.
Carregamento de amostra e centrifugação:
Carregue a amostra pré -tratada na coluna de centrífuga.
Centrifugar a coluna usando uma centrífuga para realizar uma operação de centrifugação para passar a amostra pela fase estacionária sob força centrífuga.
Eluição e coleção:
A coluna de centrifugação é eluída usando um eluente apropriado para eluir a proteína ou peptídeo alvo da fase estacionária.
Colete o eluato, que pode conter proteínas ou peptídeos alvo de alta pureza.
Processamento adicional:
Se desejado, o eluato coletado pode ser submetido a processamento adicional, como concentração, dessalinização ou substituição de buffer.
Significado
Pureza melhorada:
A cromatografia da coluna centrífuga remove efetivamente as impurezas da amostra, como pequenas moléculas, outras proteínas, ácidos nucleicos, etc., aumentando assim a pureza da proteína ou peptídeo alvo.
Rápido e eficiente:
Comparado com a tecnologia tradicional de cromatografia, a cromatografia em coluna centrífuga tem as vantagens de fácil operação e velocidade de separação rápida. Ele pode processar um grande número de amostras em um curto período de tempo, o que é adequado para o trabalho de triagem e preparação de alto rendimento.
Economia de amostra:
A cromatografia da coluna centrífuga requer menos volume de amostra e é adequada para a purificação de amostras de rastreamento. Isso é especialmente importante para amostras biológicas preciosas ou proteínas e peptídeos difíceis de obter.
Proteção da atividade proteica:
Durante a cromatografia da coluna centrífuga, a atividade da proteína ou peptídeo alvo pode ser protegida selecionando as condições de fase estacionária e de eluição apropriadas. Isso ajuda a manter sua função biológica e integridade estrutural.
Aplicações em pesquisa e produção:
A cromatografia em coluna centrífuga possui uma ampla gama de aplicações em bioquímica, biologia molecular, biotecnologia e outros campos. Pode ser usado não apenas para a purificação de amostras em experimentos de pesquisa científica, mas também para a extração e purificação de ingredientes biologicamente ativos no desenvolvimento e produção de medicamentos biológicos.
A pureza da proteína é extremamente importante para a pesquisa biológica
Na pesquisa biológica, as proteínas -alvo geralmente são misturadas com uma variedade de outras proteínas e impurezas. A remoção desses componentes não-alvo através do processo de purificação pode garantir a especificidade e a precisão dos experimentos subsequentes. As amostras de proteína de alta pureza podem reduzir os fatores de interferência em experimentos, tornando os resultados mais confiáveis.
As impurezas podem afetar a atividade da proteína ou causar degradação de proteínas. O processo de purificação remove essas substâncias nocivas, resultando em proteínas com alta atividade biológica. Isso é particularmente importante para as aplicações de descoberta de medicamentos e biotecnologia, pois a atividade de uma proteína determina diretamente sua função e efeito no organismo.
Na pesquisa biomédica, geralmente é necessário estudar a estrutura, a função e a interação de proteínas específicas. Amostras de proteína de alta pureza são a base para esses estudos. Através do processo de purificação, quantidades e pureza suficientes de proteínas -alvo podem ser obtidas para atender a essas necessidades de pesquisa. Isso é de grande significado para revelar os mecanismos regulatórios de proteínas nos organismos, o papel das doenças no processo de desenvolvimento da doença e assim por diante.
As técnicas avançadas de purificação melhoraram o rendimento e a atividade das proteínas, promovendo avanços em pesquisas médicas e aplicações industriais. As melhorias contínuas nos métodos de purificação permitem a produção mais eficiente, econômica e escalável de proteínas de alta qualidade, impulsionando a inovação e a descoberta em uma ampla gama de campos científicos. Por exemplo, no desenvolvimento biofarmacêutico, as proteínas purificadoras são um passo crítico no desenvolvimento e produção de medicamentos. Os medicamentos proteicos de alta pureza podem reduzir os efeitos colaterais e as respostas imunes e melhorar a segurança e a eficácia do medicamento.
Além da pesquisa biomédica, a pureza das proteínas também é importante em outros cenários de aplicação. Por exemplo, no monitoramento ambiental, os biossensores à base de proteínas podem ser usados para detectar poluentes; Na indústria de alimentos e cosméticos, devido ao risco de reações alérgicas, o conteúdo de proteínas e impurezas deve atender a certos padrões de segurança. Esses cenários de aplicação também requerem amostras de proteína de alta pureza para garantir a precisão e a confiabilidade.
Em resumo, a pureza das proteínas é extremamente importante para a pesquisa biológica. Não está apenas relacionado à especificidade e precisão dos experimentos, mas também afeta diretamente a atividade biológica e a integridade química das proteínas. Portanto, na pesquisa biológica, o processo de purificação das proteínas deve ser enfatizado para garantir a confiabilidade e a ciência dos resultados experimentais.
Tag: Cromatografia em coluna de rotação, fabricantes de cromatografia em coluna de rotação da China, fornecedores, fábrica
Um par de
Coluna de guarda em cromatografiaO próximo artigo
Cromatografia em coluna a vácuoEnviar inquérito
